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高速离心机分离真菌菌丝体的方法

  • 更新日期:2024-01-30      浏览次数:354
    • 1、分离方法

      1.1 用高速离心机将6种真菌的发酵产物分别置于离心管中,在20℃8000r/min条件下离心10min,分离上清液,收集的菌丝体置于培养皿中。

      1.2 减压抽滤法6种真菌的发酵产物分别用抽滤装置进行常温减压抽滤将菌丝体与发酵液分开。菌丝体保留在滤纸上,发酵液流入收集瓶中。

      1.3 多层纱布过滤法将折叠8层后的纱布放在培养皿中,分别将6种真菌的发酵产物平摊于纱布,操作者戴无菌乳胶手套,将纱布细心卷起,双手反向拧紧纱布,使发酵液与菌丝体分离,待无液体流下时,轻轻展开纱布,收集菌丝体。

      2、测定方法

      2.1 分生孢子计数用血球计数器将真菌的孢子悬浮液在显微镜下计数。

      2.2 菌丝体含水率菌株培养一定时间后,分别取不同菌种的发酵产物100ml,采用高速离心、真空抽滤和纱布过滤3种方法收集菌丝体,精确称量菌体湿重(g),然后将菌体在105℃下烘干至恒重,精确称量干重。

      2.3 高速离心法分离的菌丝体与发酵液采用高速离心法将真菌的发酵产物离心后,6种真菌均表现为菌丝体与发酵液分离,形成絮状或松散沉淀。用移液器将上清液分离后,将菌丝体置于培养皿中发现,由于菌丝体很轻(只有球毛壳菌的菌丝球坚硬),并且发酵液粘稠,导致离心后收集的菌丝体中仍含有少量发酵液。